Chromatography nyembamba ya safu ni njia ya uchambuzi wa kemikali kulingana na utumiaji wa safu ya sorbent na unene wa 0.1-0.5 mm kama awamu ya kusimama. Njia ya TLC inaweza kutumika katika nyanja anuwai na inaruhusu uamuzi wa misombo anuwai ya kemikali.
Kanuni ya njia
Njia ya chromatografia nyembamba ilizaliwa kutoka kwa chromatografia ya karatasi na majaribio ya kwanza yalifanywa katika miaka ya 80 ya karne ya 19. Matumizi ya kazi ya uchambuzi huu ulianza tu baada ya 1938.
Mbinu ya TLC inajumuisha awamu ya rununu (eluent), awamu iliyosimama (sorbent), na mchambuzi. Awamu ya kusimama hutumiwa na imewekwa kwenye sahani maalum. Sahani inaweza kutengenezwa kwa glasi, alumini au plastiki - hizi ni sehemu ndogo zinazoweza kutumika ambazo zinapaswa kuoshwa vizuri, kukaushwa na kutayarishwa kwa utumiaji wa mchawi kila baada ya matumizi. Inawezekana pia kutumia sahani za karatasi ambazo hutolewa baada ya matumizi.
Gel ya silika hutumiwa mara nyingi kama awamu ya kusimama, lakini inawezekana kutumia wachawi wengine, kwa mfano, oksidi ya aluminium. Unapotumia hii au hiyo sorbent, teknolojia lazima ifuatwe madhubuti ili matokeo yawe sahihi, kwa mfano, kwa sababu gel ya silika inaweza kutoa matokeo yasiyo sahihi ikiwa hewa katika maabara ni yenye unyevu sana.
Vimumunyisho hutumiwa kama awamu ya rununu, kwa mfano, maji, asidi asetiki, ethanoli, asetoni, benzini. Uchaguzi wa kutengenezea lazima uchukuliwe kwa uwajibikaji, kwa sababu matokeo ya chromatografia moja kwa moja inategemea sifa zake (mnato, wiani, usafi). Kutengenezea kwa kibinafsi kunachaguliwa kwa kila sampuli iliyochambuliwa.
Uchambuzi
Sampuli lazima ipunguzwe katika kutengenezea. Ikiwa utaftaji kamili haufanyiki na uchafu mwingi unabaki, basi sampuli inaweza kusafishwa na uchimbaji.
Matumizi ya sampuli kwenye sahani yanaweza kufanywa kiatomati au kwa mikono. Matumizi ya moja kwa moja hutumia njia ya microspray ambapo kila sampuli imenyunyizwa kwenye eneo linalofaa la mkatetaka. Kwa matumizi ya mwongozo, micropipette hutumiwa. Alama za penseli zimewekwa kwenye bamba kwa kila sampuli. Kila sampuli inatumiwa na capillary kwenye bamba kwenye mstari mmoja kwa umbali wa kutosha kutoka kwa alama ili usiguse na kaboni kutoka kwa risasi.
Sahani imewekwa ndani ya chombo, chini ya ambayo laini hutiwa. Msaada umewekwa na makali moja ndani ya chombo hadi laini iliyowekwa alama. Chombo hicho kimefungwa vizuri ili kuzuia uvukizi wa awamu ya rununu. Chini ya hatua ya vikosi vya kapilari, rangi huanza kuinua safu ya uchungu. Wakati eluent inapofikia kiwango fulani, sahani huondolewa kwenye chombo na kukaushwa.
Ikiwa dutu inayotakiwa haina rangi, basi haitaonekana kwenye substrate. Kwa hivyo, taswira hufanywa - usindikaji wa sahani na mvuke wa iodini au rangi zingine.
Baada ya usindikaji kama huo, matokeo yanatathminiwa. Maeneo yenye rangi ya kiwango tofauti yanaonekana kwenye sorbent. Kuamua dutu (au kikundi cha vitu), maeneo yenye rangi, saizi yake, nguvu na uhamaji hulinganishwa na sampuli ya kumbukumbu.
Njia ya TLC inatumiwa sana kwa sababu ni ya haraka, ya bei rahisi, sahihi, ya angavu, haiitaji vifaa ngumu, na ni rahisi kutafsiri.
